Wnt 信号通路在胚胎发育、细胞分化、组织稳态维持以及疾病发生发展等过程中发挥着至关重要的作用。Wnt-3a 作为 Wnt 信号通路的关键激活因子，在类器官培养、药物研发、基础生物学研究等领域应用广泛。目前，市场上存在重组 Wnt-3a 和 Wnt-3a surrogate 两种形式可供选择，它们在结构、功能、制备方法等方面存在差异，适用于不同的应用场景。

1. 来源与制备

• 重组Wnt-3a Protein
  • 通过基因工程技术，将编码 Wnt-3a 的基因导入到合适的表达系统中，如大肠杆菌、酵母或哺乳动物细胞等，然后利用这些细胞来表达和生产。表达后的蛋白需要经过一系列的纯化步骤，以获得高纯度的重组 Wnt-3a。
• Wnt-3a Surrogate Protein
  • 通过人工设计和改造得到，如可能基于 Wnt-3a 的功能结构域与其他稳定蛋白（如抗体 Fc 段）融合，或通过优化氨基酸序列提高稳定性。经改造后的基因导入细胞（如 HEK293 细胞）中进行表达。通过对细胞进行培养和诱导，使其合成并分泌 Wnt-3a surrogate 蛋白，然后经过纯化等工艺获得最终产品。

2. 结构与修饰

• 重组Wnt-3a Protein
  • 具有与天然 Wnt-3a 相似的生物学功能，可与细胞膜上的 Frizzled 蛋白和脂蛋白受体相关蛋白 5/6（LRP5/6）共受体结合，激活经典的 Wnt 信号通路。
  • 依赖脂质修饰维持其疏水性，易形成聚集体，需添加载体（如 CHAPS 去垢剂）维持溶解性。
• Wnt-3a Surrogate Protein
  • 结构简化：可能仅保留 Wnt-3a 的受体结合域（如 Frizzled 结合区域），或通过融合蛋白形式增强稳定性。但也可能导致其在模拟天然 Wnt-3a 信号传导的精确性上存在一定局限性。
  • 因特殊的结构修饰，如与 Fc 片段融合以增加稳定性和水溶性，或进行其他化学修饰等，这些修饰可能会改变其空间结构和部分性质，使其在稳定性、溶解性等方面优于天然 Wnt-3a。

3. 功能与活性

• 重组Wnt-3a Protein
  • 激活经典 Wnt/β-catenin 信号通路，调控靶基因表达（如干细胞维持、细胞增殖）。
  • 活性受浓度和微环境影响大，需严格控制实验条件（如添加载体蛋白）。
• Wnt-3a Surrogate Protein
  • 也能激活 Wnt 信号通路，但激活能力和方式可能与重组 Wnt-3a 有所不同。例如：
    • 部分 Surrogate 蛋白通过结合 Frizzled 和 LRP 受体模拟 Wnt 作用，但信号持续时间更长。
    • 可能缺乏天然 Wnt 的多效性（如非经典通路调控能力）。
  • 稳定性高，适合长期处理实验（如类器官培养）。

4. 应用场景

• 重组Wnt-3a Protein
  • 更适合用于深入探究 Wnt 信号通路的精确调控机制、胚胎发育过程中细胞命运决定等对蛋白结构和功能要求高的研究。
• Wnt-3a Surrogate Protein
  • 适用于对 Wnt 信号通路进行初步探索和高通量筛选的研究，如大规模培养类器官用于药物筛选及长期细胞培养等。
  • 在无血清培养基中稳定性更佳，水溶性也更好。
  • 因其稳定性和活性较好，也适用于临床前研究中动物模型的实验，以评估其在组织修复和再生中的效果，为未来的临床应用提供实验依据。

5. 选择建议​

1) 根据实验目的选择​

· 机制研究​

若实验聚焦于揭示 Wnt 信号通路在胚胎发育、细胞分化等过程中的分子机制，或探索 Wnt-3a 与下游靶基因的精确调控关系，重组 Wnt-3a 是首选。​

· 应用研究​

在类器官规模化培养、高通量药物筛选等应用场景中，Wnt-3a surrogate 优势显著。其高稳定性和强激活能力可快速启动 Wnt 信号，加速类器官生长，缩短培养周期。​

2) 考虑实验系统特性​

· 细胞类型​

不同细胞对 Wnt-3a 响应存在差异。肠上皮干细胞、神经干细胞等对信号精确性要求高，重组 Wnt-3a 能提供生理性信号刺激，维持细胞正常功能与特性。而肿瘤细胞系、部分永生化细胞对信号特异性要求较低，Wnt-3a surrogate 可凭借稳定高效的激活能力，快速促进细胞增殖，适用于大规模细胞培养与初步机制探索。​

· 培养条件​

培养基成分显著影响 Wnt-3a 稳定性。在无血清培养基中，重组 Wnt-3a 易降解聚集，需添加 BSA 等保护剂维持活性；而 Wnt-3a surrogate 经结构修饰，在无血清环境下稳定性更佳，更适合无血清培养体系。​

· 评估成本与可获取性​​

对比市面各家重组Wnt-3a 和Wnt-3a surrogate商业化产品，根据预算选择合适的类型。 ​

3) 参考数据可靠性与可重复性​

· 批次间一致性​

· 活性验证​​

4) 借鉴文献与经验​

· 文献调研​

借助各大数据库如PubMed，重点关注与自己实验相似的研究。​

· 预实验比较​

条件允许时，开展预实验对比两种产品效果。设置相同实验参数，观察类器官生长、细胞增殖分化、信号通路激活等指标。同时预实验也能更好的帮助您优化使用浓度、作用时间等参数，为正式实验奠定基础。

· 咨询专家​

联系领域内专家、专业公司技术人员，参加学术会议、研讨会，获取实际操作经验。

乔默生物作为国内新兴重组细胞因子生产商，为您提供高品质Wnt-3a surrogate产品：

产品名称：Human Wnt-3a Surrogate, Fc Tag, HEK293

产品货号：CM193-5HP/20HP/100HP/500HP/1000HP

规格：5ug，20ug，100ug。500ug，1mg

货期：现货

表达体系：HEK293

标签：hIgG1 Fc (C-term)

纯度：>95% as determined by SDS-PAGE analysis.

内毒素：<0.1 EU per 1 μg of the protein by the LAL method.

支原体：未检测到