亲和力是判定分子间相互作用的重要参数,是了解分子以及药物的发现与筛选等的重要指标,除了亲和力之外,还有两个对分子间相互作用评估至关重要的指标(Ka,Kd)。对于药效的评价、生物大分子及其复合体的稳定性的评估需要从动力学、热力学和热稳定性等方面进行包括分子间的结合、结合的快慢、结合的强弱、结合的机理等多方面的全面性研究。
LSPR分子互作技术:LSPR局域等离子共振技术是以纳米金颗粒为检测单位的新一代SPR技术。不同于传统SPR技术检测折射率改变引起的SPR角度的偏转,LSPR检测的是纳米金颗粒表面分子层厚度的变化产生的光吸收峰的位移。由于光波长的变化受环境影响小,对体积、温度、缓冲液折射率等变化干扰不敏感,因此该系列产品的检测结果在保证了与传统SPR技术相近的精确度和灵敏度的同时,采用更为简易的光路系统及操作过程,极大地降低了SPR技术的实验门槛,可再生的芯片同时降低了后期使用的各项成本 。此一系列的优势使得LSPR技术有望成为生命科学研究实验必备的技术平台支撑。
乔默生物基于LSPR平台为生物医药研发、科研客户提供相应的分子互作分析测试服务,能够实现对蛋白,抗体、抗体片段、多肽、DNA/RNA、纳米材料及小分子化合物等相互作用的定性定量分析,其次也可征对细胞裂解液、核酸文库等依托LSPR-Selex技术垂钓筛选未知靶点。
检测范围:包括蛋白-蛋白、抗体-抗原、蛋白-小分子、抗体-多肽、蛋白-DNA、DNA-DNA、蛋白-纳米材料等分子间相互作用力检测;除了蛋白、抗体外,细胞裂解液、细菌等也可结合LSPR-MS垂钓质谱等技术鉴定调控蛋白;也可在药物筛选、医疗诊断、环境食品检测、血液标志物检测等领域有广泛应用。
服务内容:
· 蛋白样品制备(可选)
· 分子间亲和力定性
· 亲和力测试
交付内容:
· 蛋白/抗原/抗体
· 亲和力报告(定性分析)
· 亲和力报告(定量分析);结合常数(Ka)、解离常数(Kd)和亲和常数(KD); 亲和力强弱排序。
交付时间/周:2-3周
产品要求:
1. 配体蛋白(标记芯片)
1.1. 纯度大于90%
1.2. 浓度大于0.1ug/ul(尽可能高),提供10ug左右。
1.3. 需提供配体蛋白的等电点
1.4. 配体蛋白缓冲液尽量避免Tris等带有氨基基团的试剂
1.5. 避免颗粒或絮状沉淀
2. 分析物(流动相)
2.1. 纯度大于80%
2.2. 浓度大于0.1ug/ul(尽可能高),提供冻干粉最好。根据样本情况,提供10-100ug左右。
2.3. 提供准确分子量和浓度以及溶剂成分
2.4. 溶剂最好不能含有有机化合物,如:DMSO 甘油。如果一定需要加入有机溶剂,就尽量提供高浓度的分析物,通过稀释可以降低其含量比。
2.5. 尽可能不含有海藻糖,BSA,蔗糖等保护剂。如果一定需要加入,需提供准确的浓度,以及尽可能提供高浓度含分析物原液,以便通过稀释降低其含量比,稀释后上样终浓度中抗原抗体保护剂浓度≦0.01%既可。
产品优势:
1. 技术优势:乔默生物着力于分子互作方法学开发、应用以及技术服务,给客户提供从SPR技术服务到诊断产品开发,再到分子互作仪一体化解决方案。
2. 高通量、高灵敏度检测:研锦生物可同时检测多个样本,可以检测浓度范围:0.1nM-1mM样本,亲和力检测范围:fM-mM。
3. 应用范围宽广:耐受各种溶液环境,直接检测粗制样品,比如血清、组织裂解液、病毒大分子等。
4. 满足不同实验需求:10种芯片,针对不同配体与分析体的相互作用检测,包括空白纳米金,COOH,NH2,NTA,Streptavidin,Biotin等。
5. 抗干扰能力强:检测不受温度、缓冲液折射率等外界环境影响。
6. 无需标记实时分析:节省时间和材料,实时监测。
7. 功能强大:可用于蛋白、核酸、脂类、多肽、纳米材料等大小分子相互作用分析。
8. 应用领域广泛:生化、药物开发、肿瘤研究,免疫学研究、抗体工程等。